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不同的氨基酸帶有不同化學性質(zhì)的側(cè)鏈基團，有的帶有堿性側(cè)鏈，有的帶有酸性側(cè)鏈，由此組成的蛋白質(zhì)具有不同數(shù)目的堿性基團和酸性基團，這些基團會使蛋白質(zhì)在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷，整個蛋白質(zhì)分子帶正電荷多，即為堿性蛋白(等電點偏向酸性)；整個蛋白質(zhì)帶負電荷多，即為酸性蛋白質(zhì)(等電點偏向酸性)。利用蛋白質(zhì)的兩重性(酸堿性)及與酸性和堿性染料離子形成鹽的能力，在pH=2.2（即所有蛋白質(zhì)等電點之下），全部蛋白質(zhì)能被固綠染色；在pH=8.1~8..2范圍內(nèi)，堿性蛋白質(zhì)被固綠染色。

Leagene酸性固綠染色液是利用酸性蛋白質(zhì)與帶有正電荷的酸性染料固綠結(jié)合進行染色，細胞中含量最為豐富的酸性蛋白主要存在于細胞質(zhì)和核仁中，因此染色后細胞質(zhì)和核仁大部分被染成綠色。由于酸性條件pH為2.2上下，在所有蛋白質(zhì)等電點之下，因此全部蛋白質(zhì)能被固綠染色，因此，酸性固綠染色液也被稱作總蛋白固綠染色液。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。